Turşu Proteazı

Tətbiq və prinsip

Bu turşu proteaz, Aspergillus oryzae var və Aspergillus niger var-dan alınan preparatların tirozin əsasında (HUT) hemoglobin vahidi şəklində ifadə edilən proteolitik aktivliyi təyin etmək üçün istifadə olunur və digər proteazların pH 4.7-dəki aktivliyini təyin etmək üçün istifadə edilə bilər. . Test, hemoglobin substratının pH 4.7 və 40Â ° -də 30 dəqiqəlik enzimatik hidrolizinə əsaslanır. Hidroliz olunmamış substrat trikloroasetik turşu ilə çökdürülür və filtrasiya yolu ilə çıxarılır. Süzüntüdə həll olan hemoglobinin miqdarı spektrofotometrik olaraq təyin olunur.

Turşu Proteazının Reaktivləri və Çözümləri
Hemoglobin Hemoglobin Substrat Pudra (Sigma Chemical Co., Kataloq No. H2625) və ya suda tamamilə həll olan bənzər bir yüksək dərəcəli material istifadə edin.
Asetat tampon məhlulu 136 q sodyum asetatı (NaC2H3O2 · 3H2O) 500 ml etmək üçün kifayət qədər suda həll edin. Bu məhluldan 25.0 ml 50.0 ml 1 M sirkə turşusu ilə qarışdırın, su ilə 1000 ml-ə qədər qarışdırın və qarışdırın. Bu məhlulun pH dəyəri 4.7 ± 0.02 olmalıdır.
Substrat Solüsyonu 4.0 g Hemoglobin'i 250 ml bir stəkana köçürün, 100 ml su əlavə edin və həll etmək üçün 10 dəqiqə qarışdırın. Bir pH metrinin elektrodlarını məhlula batırın və davamlı qarışdırarkən 0,3 N xlorid turşusu əlavə edərək pH-ı 1,7-ə düzəldin. 10 dəqiqədən sonra 0,5 M sodyum asetat əlavə edərək pH-ı 4.7-ə düzəldin. Solüsyonu 200 ml həcmli bir kolbaya köçürün, su ilə həcmdə seyreltin və qarışdırın. Bu həll soyudulduqda təxminən 5 gün sabitdir.
Trikloroasetik turşu məhlulu 140 q trikloroasetik turşunu təxminən 750 ml suda həll edin. Solüsyonu 1000 ml həcmli bir kolbaya köçürün, su ilə həcmdə seyreltin və hərtərəfli qarışdırın.

Nümunənin hazırlanması Hər bir ml-də 9 ilə 22 HUT arasında olan bir məhlul istehsal etmək üçün bir miqdarda nümunəni Asetat Tampon Solüsyonunda həll edin. (Belə bir konsentrasiya aşağıda göstərilən prosedurda, üstünlük verilən 0,2 ilə 0,5 arasında bir udma göstəricisi əmələ gətirəcəkdir.)

Asit Proteazının proseduru
25.0 × 150 mm test borularından hər birinə 10.0 ml Substrat Solüsyonundan pipet qoyun: hər ferment testi üçün bir və alt qat üçün boşluq. Boruları 40 ° -də bir su banyosunda təxminən 5 dəqiqə qızdırın. Substrat boşluğu xaricində hər bir boruya, 2.0 ml nümunə hazırlanması əlavə edin və məhlulun əlavə olunduğu anda reaksiya vaxtını təyin etməyə başlayın; substrat boş borusuna 2.0 ml Acetate Buffer Solüsyonu əlavə edin. Boruları 4 nömrəli rezin tıxaclarla bağlayın və qarışdırmaq üçün hər boruyu avucun üstünə 30 saniyə yavaşca vurun. Hər boruyu su banyosunda 40 ° -də tam 30 dəqiqə qızdırın və sonra hər boruya 10.0 ml Trichloroacetic Acid Solüsyonunu sürətlə pipetləyin. Hər bir borunu təxminən 40 saniyə ərzində tıxacla sıx bir şəkildə silkələyin və sonra 1 saat ərzində otaq temperaturunda soyumağa icazə verin, bu müddət ərzində hər boruyu tıxacın üstünə 10 - 12 dəqiqə aralıqlarla sallayın. Ferment boşluqlarını aşağıdakı kimi hazırlayın: Ayrı borularda 10.0 mL Substrat məhlulu və təxminən 5 ml Nümunə preparatı su banyosunda 30 dəqiqə isidin, sonra 10.0 ml Trichloroacetic Acid Solüsyonunu Substrat həllinə əlavə edin, yaxşıca silkələyin. 40 saniyə ərzində və bu qarışığa 2.0 ml əvvəlcədən qızdırılan Nümunə Hazırlanması əlavə edin. Yenidən silkələyin və otaq temperaturunda 1 saat sərinləyin, 10-12 dəqiqə aralıqlarla silkələyin.
1 saatın sonunda hər boruyu güclü bir şəkildə silkələyin və 11 sm-lik Whatman No. 42 və ya ekvivalent filtr kağızı ilə süzün, süzüntüün birinci yarısını eyni kağıza süzün. Aləti sıfıra qoymaq üçün substrat boşluğundan süzgəcdən istifadə edərək uyğun bir spektrofotometrlə 275 nm-də 1 sm-lik bir hüceyrədə hər bir filtratın udma qabiliyyətini təyin edin. Müvafiq ferment boş oxu çıxarılaraq hər oxunuşu düzəldin və AU olaraq alınan dəyəri qeyd edin.
[Qeyd: 0.2 ilə 0.5 arasındakı düzəldilmiş bir udma əmsalı alınmadıqda, lazım olduqda ferment preparatının az və ya çoxunu istifadə edərək testi təkrarlayın.]

Əvvəllər sabit çəkiyə qədər qurudulmuş 100.0 mq L-tirozin, xromatoqrafik dərəcəli və ya ekvivalenti (Aldrich Chemical Co.) 1000 ml həcmli bir qaba köçürmə. 60 mL 0.1 N xlorid turşusunda həll edin. L-tirozen tamamilə həll edildikdə, məhlulu su ilə həcmdə seyreltin və hərtərəfli qarışdırın. Bu məhlul 1.0 ml-də 100 ig tirozin ehtiva edir. Bu stok məhlulundan üç ml daha seyreltmə hazırlayın ki, ml başına 75.0, 50.0 və 25.0 µg tirozin olsun. Dörd məhlulun 0,006 N xlorid turşusuna qarşı uyğun bir spektrofotometrdə 1 sm hüceyrədə 275 nm-də udma qabiliyyətini təyin edin. Tirozin konsentrasiyasına qarşı bir udma sahəsi hazırlayın. Döngənin yamacını tirozinin µg başına udma baxımından təyin edin. Bu dəyəri 1.10 ilə vurun və AS olaraq qeyd edin. Təxminən 0,0084 dəyər əldə edilməlidir.

Turşu Proteazının Hesablanması
Bir HUT proteolitik vahid (turşu proteaz) fəaliyyət göstərilən şərtlərdə 1 dəqiqə ərzində 275 nm-də udma qabiliyyəti 0,006 N xlorid turşusunda 1,10 ug / mL tirozin olan məhlulla eyni olan bir hidrolizat istehsal edən ferment miqdarı olaraq təyin olunur.
Orijinal ferment preparatının hər g başına HUT'u tənliklə hesablayın

HUT / g = (AU / AS) × (22 / 30W)

içində 22, test həllinin son həcmi; 30 reaksiya müddəti, dəq; və W - götürülmüş orijinal nümunənin g-dəki çəkisi.

[Qeyd: Diqqətlə nəzarət olunan və standart şərtlər altında AS üçün dəyər 0,0084; bu dəyər rutin iş üçün standart əyridən alınan dəyər əvəzinə istifadə edilə bilər, lakin daha dəqiq nəticələr və şübhə hallarında standart əyridən hesablanan dəqiq dəyər istifadə olunmalıdır.]

ANALİZ SERTİFİKATI

Məhsulun adı	Turşu Proteazı
Digər ad	Yoxdur	Mənşə ölkəsi	Çin
Gərginlik	Aspergillus oryzae	İstehsal tarixi	13 MAY 2019
Partiya nömrəsi	SP19050903	Son istifadə tarixi	12 MAY 2021
Paket	25 kq / vedrə	Miqdarı	100 kq
Protokol	XÜSUSİYYƏTLƏRİ	NƏTİCƏLƏR	METOD
FİZİKİ VƏ KİMYASAL TƏHLİL
Təsvir	qəhvəyi toz	Uyğundur	Vizual
Qoxu və dad	Xarakterik qoxu və dad	Uyğundur	Dadı
Nəm	NMT 7%	5,1%	Nəm analizatoru
TANIMA
Müəyyənləşdirilən fəaliyyət	Bromelain Fəaliyyəti üçün müsbətdir	Uyğundur	Daxili
FƏALİYYƏT
Proteaz fəaliyyəti	NLT 500,000 HUT / g	508,270 HUT / g	FCC VII
MİKROBİYOLOJİK
Ümumi bakteriyalar sayılır Koliform bakteriyalar (CFU / g) Kalıplar və mayalar E.Coli Salmonella Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa	NMT 3000 CFU / q NMT 30 CFU / q NMT 100 CFU / q Yoxdur Yoxdur Yoxdur Yoxdur	500 CFU / q 10 CFU / q 10 CFU / q Aşkar edilmədi Aşkar edilmədi Aşkar edilmədi Aşkar edilmədi	FDA BAM Online Ch.3 FDA BAM Online Ch.4 FDA BAM Online Ch. 2 FDA BAM Online Ch.4 FDA BAM Online Ch.5 FDA BAM Onlayn Ch.12 AOAC
AĞIR METALLAR
Qurğuşun Merkuri Kadmiyum Arsenik	NMT 3 ppm NMT 0.1 ppm NMT 1 ppm NMT 1 ppm	0,21 ppm ＜0.1 ppm p1 ppm ＜1ppm	USP <231> USP <231> USP <231> USP <231>
Saxlama: İşıqdan qorunan sərin və quru yerdə saxlayın, istifadə olunmadıqda barabanı yaxın saxlayın. Nəticə: IU Standartlarına uyğundur. Raf ömrü: Asit Proteazın təyin olunmuş saxlama şərtləri və hava keçirməyən qablaşdırma şəraitində saxlama müddəti 2 il olacaqdır. Məhsul yuxarıda göstərilən xüsusiyyətlərə uyğundur RICKY H. ZHU Səlahiyyətli İmzalayan tərəfindən təsdiq edilmişdir

*The above information is a direct translation of the information provided to Newgen Biotech from the manufacturer of turşu proteaz. This Certificate of Analysis should be used for informational purposes and is not intended as a substitute for strict quality control analysis by the purchaser of this product.

Qablaşdırma və saxlama

Qatı qida qablaşdırma torbası, 25 kq / barel.

Asit Proteaz quru, sərin və yaxşı havalandırılan yerlərdə günəşdən, istidən uzaqda saxlanılmalıdır.

Ödəniş :T / T, Paypal, Western Union, Alibaba Ticarət Zəmanəti, VISA, MasterCard, e-Checking, Sonra Ödənin, LC və s.